Ensayo preclínico de terapia celular con epitelio pigmentario de la retina.

Introducción
Dentro de las posibles vías de tratamiento para la degeneración macular asociada a la edad (DMAE) está la sustitución de las células dañadas por material celular nuevo como es el caso de las células del epitelio pigmentario de la retina (EPR) cuya degeneración conlleva la muerte de los fotorreceptores.

 

Objetivosterapia-genica-DeLaCerda-cabimer-macula-retina

Producir un material útil para el trasplante celular; en este caso EPR diferenciado en el laboratorio partiendo de células del donante. El desarrollo de una terapia celular a partir de células del propio paciente limita la posibilidad de un rechazo inmunitario del injerto. Como soporte biocompatible para las células y para poder realizar un trasplante celular orientado, se ha estudiado la compatibilidad del EPR con una matriz de fibrina-agarosa.

Material y Métodos
Reprogramación de monocitos a iPS mediante factores de Yamanaka transducidos por un virus Sendai no integrativo.

Diferenciación de iPS a EPR según el método de Vaajasaari, H. et al. (2011) Mol Vis 17.

Caracterización de EPR por expresión génica, inmunofluorescencia, microscopía óptica y electrónica.

Estudio funcional por ensayo de fagocitosis de segmentos externos de fotorreceptores y resistencia transepitelial. Fabricación de una matriz biocompatible de fibrina agarosa nanoestructurada en UPRC-Cartuja-LARCEL.

Ensayo de compatibilidad EPR-matriz. Trasplante celular en el espacio subretiniano de modelos de la enfermedad.

Resultados
A partir de monocitos se ha obtenido una línea de iPS, y por diferenciación celular se ha generado un cultivo de EPR cuya caracterización a nivel molecular, celular y funcional corresponde al EPR normal. Se ha estudiado la adaptación del cultivo de EPR al crecimiento sobre matriz
nanoestructurada de fibrina-agarosa como soporte para el implante, obteniéndose un crecimiento correcto y un mantenimiento de la diferenciación celular. Se ha realizado un ensayo de trasplante de la matriz-EPR en el espacio subretiniano de ratón y se ha comprobado la ausencia de toxicidad y de rechazo, además de la viabilidad de las células EPR hasta las tres semanas post-trasplante.

Autores:

B. De la Cerda 1 , A.B. García-Delgado, S. Calado SM, L. Valdés-Sánchez,, E. Rodríguez-Bocanegra,
B. Fernández-Muñoz, G. Carmona, R. Sánchez-Pernaute, B. Ponte-Zuñiga, S. S. Bhattacharya, F.J.
Díaz-Corrales*.
*francisco.diaz@cabimer.es; 1 berta.delacerda@cabimer.es

Poster presentado en el 1er Congreso Europeo de pacientes de Mácula y Retina